【摘要】目的：分析擬行輔助生殖技術(shù)夫婦的染色體核型異常情況并探討行染色體檢查的必要性，為此類患者遺傳咨詢及輔助生殖技術(shù)的選擇提供依據(jù)。方法：收集天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院近15年擬行IVF/ICSI-ET并行染色體核型分析的2621例患者，其中男性患者1365例，女性患者1256例。女性患者中無流產(chǎn)史573例，1次流產(chǎn)史446例，≥2次流產(chǎn)史237例。采用染色體G顯帶技術(shù)進(jìn)行核型分析。結(jié)果：2621例患者中發(fā)現(xiàn)染色體異常71例，異常率為2.71%,其中男性35例（2.56%），女性36例（2.87%），染色體多態(tài)性率為4.85%.女性患者中有流產(chǎn)史組的染色體異常率與無流產(chǎn)史組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：擬行輔助生殖技術(shù)人群中染色體異常率較高，建議行輔助生殖技術(shù)前常規(guī)行染色體檢查。
　　
　　【關(guān)鍵詞】染色體異常；多態(tài)性；生殖異常；體外受精/單精子胞漿內(nèi)注射-胚胎移植
　　
　　輔助生殖技術(shù)為15%存在生殖異常的夫婦帶來了生育希望。目前關(guān)于擬行輔助生殖技術(shù)的人群染色體異常情況的文獻(xiàn)較少，行IVF/ICSI-ET前是否常規(guī)行染色體檢查尚無定論。本研究采用回顧性研究方法了解擬行IVF/ICSI-ET患者的染色體異常情況，探討常規(guī)染色體檢查的必要性，為染色體異常患者的遺傳咨詢、輔助生殖技術(shù)的選擇及后續(xù)的產(chǎn)前診斷提供依據(jù)。
　　
　　1資料與方法
　　
　　1.1研究對(duì)象 選取1999年1月至2015年12月于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院準(zhǔn)備接受IVF/ICSI-ET并行染色體核型分析的患者2621例，其中男性1365例，年齡24~46歲，女性1256例，年齡22~49歲。女性患者中，無流產(chǎn)史者573例，1次流產(chǎn)史者446例，≥2次流產(chǎn)史者237例。
　　
　　1.2染色體核型分析 采集外周血2ml進(jìn)行淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)68~72h收獲細(xì)胞，進(jìn)行染色體制備及G顯帶。每例計(jì)數(shù)20個(gè)中期分裂相，分析3個(gè)核型，發(fā)現(xiàn)核型異常時(shí)增加計(jì)數(shù)分析。根據(jù)人類細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制（ISCN1999和ISCN2009）命名染色體核型。
　　
　　1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料組間比較采用卡方檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　
　　2結(jié)果
　　
　　2.1染色體異常和染色體多態(tài)性的核型分析 2621例患者中共檢出染色體異常71例，異常率為2.71%,常染色體結(jié)構(gòu)異常18例，異常率為0.69%（18/2621），未檢出數(shù)目異常。性染色體結(jié)構(gòu)異常2例，異常率為0.08%（2/2621），數(shù)目異常50例，異常率為1.91%（50/2621）。男性性反轉(zhuǎn)1例，異常率0.04%（1/2621）。1365例男性患者中檢出染色體異常35例，染色體異常率為2.56%;1256例女性患者中檢出染色體異常者36例，異常率2.87%;男性與女性患者的染色體異常率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=0.227,P=0.634）。女性患者中，有流產(chǎn)史者的染色體異常率為3.66%（25/683），與無流產(chǎn)史者[1.92%（11/573）]比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=3.391,P=0.066）。1次流產(chǎn)史與≥2次流產(chǎn)史的染色體異常率分別為3.81%（17/446）和3.38%（8/237）比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=0.083,P=0.773）。2621例患者中檢出染色體多態(tài)性127例，染色體多態(tài)性率為4.85%,其中男性多態(tài)性率為6.01%（82/1365），女性多態(tài)性率為3.58%（45/1256）。
　　
　　2.2各種類型染色體異常和多態(tài)性的檢出情況 35例男性患者染色體異常中，常染色體結(jié)構(gòu)異常15例，構(gòu)成比為42.86%（15/35）；未檢出常染色體數(shù)目異常；性染色體結(jié)構(gòu)異常1例；性染色體數(shù)目異常18例，構(gòu)成比為51.43%（18/35）。染色體多態(tài)性以大Y、小Y染色體和inv（9）較為常見，構(gòu)成比分別為34.15%（28/82）、12.20%（10/82）、19.51%（16/82）。36名女性患者染色體異常中，常染色體結(jié)構(gòu)異常3例，構(gòu)成比為38.33%;未檢出常染色體數(shù)目異常；性染色體結(jié)構(gòu)異常1例；性染色體數(shù)目異常32例，構(gòu)成比分別為88.89%（32/36）。染色體多態(tài)以1qh+、inv（9）和16qh+較為常見，構(gòu)成比分別為51.11%（23/45）、22.22%（10/45）、13.33%（6/45）。見表1.
　　 　　
　　3討論
　　
　　染色體是遺傳物質(zhì)的載體，染色體異常，無論是結(jié)構(gòu)異常還是數(shù)目異常對(duì)生育的影響均較大。夏家輝等[1]主編的《醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)》中普通人群染色體異常率為0.5%.本研究發(fā)現(xiàn)，這類人群中染色體異常率為2.71%,這與周煒等[2]報(bào)道的擬行IVF/ICSI-ET人群的染色體異常率2.60%一致，是普通人群染色體異常率的5.4倍。本研究中常染色體結(jié)構(gòu)異常以平衡易位最常見，發(fā)生率為0.46%.平衡易位患者在減數(shù)分裂過程中理論上形成18種配子，它們與正常配子結(jié)合，只產(chǎn)生1種正常合子，1種易位攜帶的合子，其余16/18均為不平衡合子。這些不平衡合子的胚胎在發(fā)育過程中極易出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎、畸形等。本研究中男性平衡易位攜帶者均有配偶流產(chǎn)的病史。這部分患者中易位的染色體種類、斷裂點(diǎn)的位置、易位攜帶者的性別都可能對(duì)妊娠結(jié)局產(chǎn)生一定的影響[3].江美燕等[3]研究表明，平衡易位患者男性不育發(fā)生率、生育正常或平衡易位后代的機(jī)率均高于女性，自然流產(chǎn)發(fā)生率低于女性，差異均有顯著意義。由于本研究中平衡易位患者的例數(shù)較少，無法行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。平衡易位的特殊形式是羅氏易位，羅氏易位又稱著絲粒融合，是發(fā)生于近端著絲粒染色體之間的一種易位。兩個(gè)近端著絲粒染色體在著絲粒部位或附近發(fā)生斷裂，兩者的長(zhǎng)臂在著絲粒處重接，形成一條由長(zhǎng)臂組成的衍生染色體，短臂形成的小染色體由于缺乏著絲粒或完全由異染色質(zhì)構(gòu)成，往往于第二次分裂時(shí)丟失。羅氏易位經(jīng)減數(shù)分裂后形成6種配子：1種正常，1種為平衡易位，其它4種都為具有染色體缺失或重復(fù)的配子。羅氏易位中的同源羅氏易位不能形成正常配子，所以同源羅氏易位患者不能生育表型正常的子代，曾檢出1例核型為45,XX,inv（9），del（15q15q）的同源羅氏易位患者，婚后3年相繼自然流產(chǎn)13次[4].結(jié)構(gòu)異常中倒位較常見，倒位染色體在減數(shù)分裂同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)，如倒位片段很小，倒位片段可能不發(fā)生配對(duì)，其余區(qū)段配對(duì)正常；如倒位片段很長(zhǎng)，倒位的染色體可能和正常的染色體配對(duì)，形成一個(gè)倒位環(huán)，產(chǎn)生4種類型配子：1種正常，1種為倒位，另2種則為存在部分缺失和重復(fù)形成的配子。常染色體數(shù)目異常最常見的是21三體綜合征，男性患者無生育能力，女性患者50%機(jī)率生育21三體兒。但準(zhǔn)備行輔助生殖技術(shù)的人群中，幾乎沒有常染色體數(shù)目異常，本研究中未見常染色體數(shù)目異常的患者。這部分人群中性染色體結(jié)構(gòu)異常亦較少見，主要是數(shù)目異常。男性患者中性染色體數(shù)目異常以克氏征最常見，異常率為0.88%,顯著高于Nielsen等[5]報(bào)道的普通人群克氏征的發(fā)生率1/500~600,這部分患者在青春期之前與正常男性相比癥狀不明顯，成年后患者多數(shù)因?yàn)樾〔G丸、不育、無精子癥等就診，本研究中這部分患者均為無精子癥。Dabaja等[6]報(bào)道，睪丸顯微切開取精術(shù)為克氏征患者帶來了生育希望，在精子數(shù)量、精子活力和成熟度方面都取得了巨大突破。克氏征患者在減數(shù)分裂形成配子過程中易形成異常配子從而形成染色體異常的胚胎，故需行產(chǎn)前診斷。女性患者中性染色體數(shù)目異常以45,X/46,XX嵌合為主，發(fā)生率為1.59%,對(duì)生育的影響有兩個(gè)方面：（1）患者易發(fā)生卵巢早衰，激素水平異常；（2）形成非整倍體胚胎導(dǎo)致自然流產(chǎn)。
　　
　　對(duì)于這部分患者應(yīng)根據(jù)嵌合的比例和性激素水平，采取個(gè)體化治療方案。對(duì)于準(zhǔn)備行輔助生殖技術(shù)妊娠的患者是否常規(guī)進(jìn)行染色體檢查尚無定論。Zouli等[7]報(bào)道，1例男性患者的配偶自然流產(chǎn)5次，其中采用IVF-ET2次，均在孕早期發(fā)生自然流產(chǎn)；在其發(fā)生第4次流產(chǎn)后行夫妻雙方染色體檢查發(fā)現(xiàn)，此男性患者染色體為47,XYY,女性染色體正常；在第3次實(shí)行IVF-ET并行植入前基因診斷，檢測(cè)6個(gè)胚胎只有1個(gè)胚胎染色體正常，異常率高達(dá)83.33%.胚胎染色體異常可能是該患者配偶妊娠早期自然流產(chǎn)的原因。這與范蒙潔等[8-9]報(bào)道的染色體異常在妊娠丟失中占重要作用相一致。本研究中患者由于第1次及第2次助孕前均未行染色體檢查，錯(cuò)失植入前診斷機(jī)會(huì)。本研究中無流產(chǎn)史組與有流產(chǎn)史組的染色體異常率無明顯差異，但助孕人群整體染色體異常率是普通人群的5.4倍，所以對(duì)于準(zhǔn)備行IVF/ICSI的人群，無論有無流產(chǎn)史，均建議其行夫婦雙方染色體檢查。染色體多態(tài)性是不同個(gè)體間染色體結(jié)構(gòu)和染色著色強(qiáng)度存在的恒定的非病理性細(xì)小差別，主要發(fā)生在遺傳上不活躍的含高度重復(fù)DNA的異染色質(zhì)區(qū)，多發(fā)生在1、9、16號(hào)染色體、D/G組染色體和Y染色體。此類變異一般不會(huì)引起表型效應(yīng)[10].本研究人群染色體多態(tài)性率為4.85%,普通人群染色體多態(tài)性發(fā)生率尚無確切數(shù)據(jù)。目前越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，染色體多態(tài)性對(duì)生殖方面會(huì)產(chǎn)生一定的影響，如不孕、自然流產(chǎn)等。吳正沐等[11]發(fā)現(xiàn)，行IVF-ET的患者中，染色體多態(tài)組與正常組比較，臨床妊娠率、流產(chǎn)率、活產(chǎn)率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，對(duì)于染色體遺傳多態(tài)性對(duì)生育的影響還需進(jìn)一步研究。綜上，對(duì)于擬行輔助生殖技術(shù)人群行夫婦雙方染色體檢查是必要的。對(duì)于染色體異常患者需進(jìn)行遺傳咨詢，有助于患者選擇有利的助孕方式，對(duì)受孕成功者應(yīng)行產(chǎn)前診斷，避免染色體異常兒的出生。
　　
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