[摘要]目的 探討三種血清學(xué)檢測方法在臨床診斷兒童梅毒中的應(yīng)用情況。方法 選擇沈陽市兒童醫(yī)院2014年12月至2016年2月門診及住院患者4230例，分別進(jìn)行了以下檢測：甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、梅毒螺旋體抗體檢測膠體金法（SYP）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA），并對檢測結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 用三種方法對血液標(biāo)本進(jìn)行檢測，經(jīng)任意一項檢測為陽性即視為陽性患者共28例。其中三項檢測均為陽性4例（14.3%），有兩項檢測為陽性11例（39.3%），只有一項檢測為陽性13例（46.4%）。確診陽性患者15例。在檢測中TRUST特異度（92.3%）高，但敏感度（40.0%）低；SYP敏感度（86.7%）高，但特異度（7.7%）低，均不適宜單獨(dú)作為初篩檢測試驗。應(yīng)用TRUST和SYP聯(lián)合檢測作為初篩試驗，其中任意一種為陽性結(jié)果，靈敏度為100.0%.結(jié)論 用TRUST、SYP聯(lián)合作為梅毒初篩檢測試驗；TPPA可以用作梅毒確診實驗；TRUST適宜療效觀察。
　　
　　[關(guān)鍵詞]兒童梅毒；甲苯胺紅不加熱血清試驗；梅毒螺旋體抗體檢測膠體金法；梅毒螺旋體明膠凝集試驗
　　
　　近年來，由于梅毒感染率逐漸增加[1-2],兒童梅毒的發(fā)病率也隨之上升。梅毒是由蒼白螺旋體（treponema pallidum,TP）引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病，臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜[3].兒童梅毒大多為宮內(nèi)感染所致[4],獲得性梅毒較為少見[5],但由于父母常常隱瞞病情，易延誤治療，從而給兒童身心健康及發(fā)育造成了嚴(yán)重影響。目前梅毒檢測方法主要分為病原體檢測、血清學(xué)篩選試驗及血清學(xué)確證試驗。臨床實驗室多采用血清學(xué)試驗，但單獨(dú)的試驗往往存在一定的局限性。為尋找更為合理的檢測兒童梅毒的手段，本研究應(yīng)用三種檢測方法進(jìn)行比較，以獲得較為可行的聯(lián)合檢測手段。
　　
　　1資料與方法
　　
　　1.1一般資料
　　
　　選取2014年12月至2016年2月在沈陽市兒童醫(yī)院就診的0~8歲患兒4230例。經(jīng)病史、臨床診斷及血清學(xué)檢驗均為陽性確診梅毒感染患兒15例，梅毒的血清學(xué)試驗診斷至少1種方法陽性的患兒共28例。
　　
　　1.2方法
　　
　　對4230例患兒分別進(jìn)行了甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、梅毒螺旋體抗體檢測膠體金法（SYP）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）。所有血液標(biāo)本的采集、運(yùn)輸、保存嚴(yán)格按照說明書要求，并由專門人員進(jìn)行檢測和陰陽結(jié)果判斷。
　　
　　1.3試劑
　　
　　TRUST、SYP和TPPA試劑分別采自上海榮盛生物藥業(yè)有限公司、英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司和日本富士瑞必歐株式會社。
　　
　　1.4統(tǒng)計學(xué)方法
　　
　　本研究采用描述性統(tǒng)計方法，通過對實驗結(jié)果的綜合分析找尋一個合理的檢測程序。
　　
　　2結(jié)果
　　
　　2.1不同血清學(xué)檢測方法的比較
　　
　　結(jié)合臨床資料及血清學(xué)檢測結(jié)果，確診病例為15例。在檢測中TRUST特異度較高，但靈敏度較低；SYP靈敏度較高，但特異度較低；而TPPA的特異度和靈敏度均為100.0%.TRUST、SYP、TPPA三種血清學(xué)檢測結(jié)果見表1.
　　 　　
　　2.2甲苯胺紅不加熱血清試驗和梅毒螺旋體抗體檢測膠體金法聯(lián)合檢測的比較
　　
　　應(yīng)用TRUST和SYP聯(lián)合檢測作為初篩試驗，其中任意一種為陽性結(jié)果，靈敏度為100.0%,無漏診，見表2.
　　 　　
　　2.3甲苯胺紅不加熱血清試驗滴度與其他試驗比較
　　
　　TRUST滴度檢測可作為梅毒患者療效觀察以及復(fù)發(fā)或再感染的指標(biāo)。本研究中有7例TRUST陽性患者，當(dāng)?shù)味?ge;1:64時，其他兩項試驗均為陽性，見表3.
　　 　　
　　3討論
　　
　　3.1兒童梅毒的研究現(xiàn)狀
　　
　　梅毒主要是通過性接觸和血液傳播，發(fā)病率在中國呈不斷上升的趨勢[6].梅毒螺旋體易通過胎盤感染胎兒，導(dǎo)致先天性梅毒（congenital syphilis,CS），可于新生兒期、嬰兒期和兒童期發(fā)病。目前認(rèn)為妊娠任何時期均可發(fā)生CS[7].隨著孕婦梅毒發(fā)病率的升高，CS發(fā)病率也明顯上升。兒童梅毒主要是由于在宮內(nèi)感染所致，少數(shù)可通過哺乳、輸血等接觸而傳染。小兒梅毒主要從流行病學(xué)資料、臨床表現(xiàn)、實驗室檢查等幾方面進(jìn)行診斷。超過50%的早期CS患兒在出生時表現(xiàn)正常，2/3在出生3~8周內(nèi)出現(xiàn)癥狀[7],導(dǎo)致新生兒期時CS缺乏典型的臨床表現(xiàn)。診斷梅毒要有豐富的臨床經(jīng)驗，實驗室檢測是臨床診斷的主要依據(jù)，也是監(jiān)測和防止醫(yī)院感染的重要手段[4].孕期梅毒篩查及治療可有效地預(yù)防CS[8].
　　
　　3.2梅毒檢測方法的綜合分析
　　
　　人體感染梅毒螺旋體后，體內(nèi)產(chǎn)生兩種抗體：特異性抗梅毒螺旋體抗體和非特異性抗心磷脂（Cardiolipin）抗體。非特異性抗心磷脂抗體又稱反應(yīng)素，是由梅毒螺旋體破壞的組織細(xì)胞所釋放的類脂樣物質(zhì)以及梅毒螺旋體自身的類脂和脂蛋白刺激機(jī)體產(chǎn)生的IgM和IgG體，臨床常使用TRUST方法檢測。TRUST法檢測的是一種非特異性抗體，約感染6周后可檢出，因此在梅毒感染初期及潛伏期患者，極易因漏診出現(xiàn)假陰性結(jié)果，但其滴度變化與梅毒治療情況呈正相關(guān)，因此適合用于梅毒治療的療效觀察、隨訪和復(fù)發(fā)的輔助診斷，對病情的評估有著重要的作用[9].該法操作較為簡便，結(jié)果容易判讀，其半定量試驗可作為療效觀察的指標(biāo)。以往通常單獨(dú)作為梅毒初篩的指標(biāo)。但本研究顯示該法靈敏度較低，容易出現(xiàn)假陰性而漏診，不適于單獨(dú)篩查使用。其原因為TRUST法所用抗原多可與其他非特異性抗體有交叉反應(yīng)，如風(fēng)疹、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡以及健康老年人均可造成假陽性結(jié)果。本研究中該種方法的假陽性率較低（7.7%），與其他對成人的研究不符[10],可能是因為兒童血清中干擾因素較少所致。
　　
　　SYP是新近發(fā)展起來的快速體外診斷技術(shù)，利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)純化重組基因的梅毒抗原，以膠體金作為指示標(biāo)記。該法操作簡捷、用血量少、靈敏、結(jié)果容易觀察和保存。但本研究顯示，SYP的靈敏度（86.7%）和假陽性率（92.3%）均較高，可作為篩檢方法，但需要確證試驗來排除假陽性。該方法仍存在一定的假陰性率（13.3%），如果單用該方法進(jìn)行篩查，會存在漏診的風(fēng)險，因此也不適宜用于單獨(dú)篩查。由于試驗方法的局限性，雖然有較高的假陽性率，但也存在一定的假陰性率。這也正需要聯(lián)合試驗補(bǔ)充修正。
　　
　　TPPA采用雙抗體夾心法，具有特異強(qiáng)、靈敏高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)，較多用在潛伏期及難以診斷梅毒的檢測，是目前國內(nèi)推薦的梅毒確證試驗方法。但是，該方法需要運(yùn)用手工操作和主觀判斷，并且具有極為繁瑣的步驟和較高的操作水平要求及較昂貴的價格，因此在檢測大樣本的過程中極為不利，其僅適用在確證TRUST、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、快速血漿反應(yīng)素試驗（RPR）等檢測后的陽性標(biāo)本中。除此之外，該方法的檢測原理類似于ELISA,能夠?qū)�lgG型和lgM型抗體進(jìn)行同時檢測，因此也不適用在觀察患者的療效和對患者復(fù)發(fā)及再感染情況進(jìn)行判斷。
　　
　　3.3檢測方法的聯(lián)合應(yīng)用情況
　　
　　以往的經(jīng)驗通常是先采用TRUST或SYP篩查梅毒血液標(biāo)本，如果得到陽性結(jié)果再進(jìn)行確診試驗。本研究顯示，不管采用哪種方法單獨(dú)篩查，都會存在較大的漏診風(fēng)險；然而采用兩種或兩種以上方法聯(lián)合篩查，會使這種風(fēng)險大大降低。但也不是越多方法聯(lián)合檢測越好，還應(yīng)從患者的經(jīng)濟(jì)承受能力以及臨床具體工作等方面進(jìn)行綜合分析，采用一套性價比最高的檢測方案。
　　
　　總之，基于三種血清試驗的優(yōu)缺點(diǎn)，建議采取如下程序?qū)σ伤苾和�梅毒患兒進(jìn)行血清學(xué)檢測：首先用TRUST、SYP進(jìn)行初篩，如果其中有一項陽性再用TPPA進(jìn)行確認(rèn)，這樣就可以實現(xiàn)在降低檢測成本的同時又降低了漏診、誤診的發(fā)生率；同時用TRUST法觀察患者的臨床療效及對其復(fù)發(fā)和再感染情況進(jìn)行判斷。
　　
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