摘要：目的觀察我院不同類型的臨床送檢標(biāo)本中常見的非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的分離情況，并對常用抗菌藥物耐藥特征進行分析和總結(jié)。方法分別采用MicroScanautoSCAN4全自動細(xì)菌鑒定系統(tǒng)和K-B紙片擴散法來鑒定細(xì)菌種類和進行藥物敏感試驗。結(jié)果323株非重復(fù)株中，包含假單胞菌139株、不動桿菌137株、嗜麥芽假單胞菌16株、伯克霍爾德菌屬14株、金色桿菌屬10株、無色桿菌屬7株。結(jié)論非發(fā)酵桿菌也是造成我院患者感染的一種病原菌，且沒有特異性的臨床表現(xiàn)，因此醫(yī)院不僅要做好細(xì)菌耐藥特點及趨勢的分析工作，也要做好抗生素的應(yīng)用指導(dǎo)和監(jiān)管工作。

　　

　　關(guān)鍵詞：非發(fā)酵革蘭陰性桿菌；抗生素；耐藥性

　　

　　近幾年，臨床上抗生素的大量應(yīng)用及侵入性治療使得患者出現(xiàn)感染的風(fēng)險大大增加，并且開始出現(xiàn)越來越多的耐藥株，且多重耐藥現(xiàn)象頻發(fā)。非發(fā)酵菌已經(jīng)發(fā)展成為醫(yī)院患者發(fā)生感染的一種常見致病菌。我院在最近兩年的常規(guī)檢測中分離出多種并不常見的非發(fā)酵菌，例如不動桿菌屬、伯克霍爾德菌屬、金色桿菌屬，現(xiàn)將具體情況報道如下。

　　

　　1材料與方法

　　

　　1.1菌種來源

　　

　　2013年11月至2015年11月我院細(xì)菌室分離出323株革蘭陰性非發(fā)酵菌，并由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供了銅綠假單胞菌ATCC2785、大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923三種質(zhì)控菌株。

　　

　　1.2儀器及培養(yǎng)基

　　

　　MicroScanautoSCAN4鑒定系統(tǒng)由美國德靈生產(chǎn)；Mueller-Hinfen瓊脂購于英國OX-OID公司，血瓊脂購于廣州迪景生物有限公司。

　　

　　1.3抗生素紙片

　　

　　抗生素紙片為蘭州麥迪微生物科技有限公司提供的由英國OXOID公司生產(chǎn)的15種抗菌藥物紙片，包括頭孢他啶（CAZ）、妥布霉素（TOB）、頭孢吡肟（FEP）、復(fù)方新諾明（SXT）、美洛培南（MEM）、左旋氧氟沙星（LEV）、阿米卡星（AK）、慶大霉素（CN）、氨曲南（ATM）、亞胺培南（IMP）、哌拉西林（PRL）、替卡西林（TIC）、米諾環(huán)素（MH）、頭孢哌酮/舒巴坦（SCF）和哌拉西林/他唑巴坦（TZP）。

　　

　　1.4試驗方法

　　

　　首先按照常規(guī)方法對細(xì)菌進行分離培養(yǎng)以分離得到單個細(xì)菌種群，然后借助法國API20NE條或MicroScanau原toSCAN4鑒定系統(tǒng)對細(xì)菌種類進行鑒別。遵循NCCLS制定的標(biāo)準(zhǔn)，采用K-B紙片擴散法進行細(xì)菌的藥敏試驗。

　　

　　2結(jié)果

　　

　　2.1細(xì)菌來源和分類

　　

　　本次實驗從5例中心靜脈導(dǎo)管、6例血液、32例膽汁、34例尿液、244例痰標(biāo)本中分離出323株非重復(fù)株，包含假單胞菌139株（淺黃假單胞菌2株，熒光假單胞菌2株，棲稻假單胞菌2株，斯氏假單胞菌9株，惡臭假單胞菌10株，銅綠假單胞菌114株），不動桿菌137株（鮑氏不動桿菌67株，洛菲不動桿菌69株，溶血不動桿菌1株），嗜麥芽假單胞菌16株，伯克霍爾德菌屬14株（洋蔥伯克霍爾德菌14株），金色桿菌屬10株（短小金黃桿菌7株，產(chǎn)吲哚金黃桿菌3株），無色桿菌屬7株（木糖氧化無色桿菌5株，木糖氧化無色桿菌反硝酸亞種2株）。

　　

　　2.2細(xì)菌體外藥敏

　　

　　對銅綠假單胞菌屬有較強體外抗菌活性的為：阿米卡星（97.7%）、亞胺培南（92.3%）；對不動桿菌屬（洛菲不動桿菌和鮑氏不動桿菌）有較強體外抗菌活性的是：亞胺培南（96.3%）、美洛培南（93.8%）、妥布霉素（87.8.%）；對伯克霍爾德菌屬有較強體外抗菌活性的為：米諾環(huán)素（84.6%）、美洛培南（64.2%）；對金色桿菌屬有較強體外抗菌活性的為：阿米卡星（100.0%）、頭孢哌酮/舒巴坦（100.0%）；對無色桿菌屬有較強體外抗菌活性的為：頭孢哌酮/舒巴坦（100.0%）、頭孢他啶（100.0%）、哌拉西林/他唑巴坦（100.0%）、哌拉西林（100.0%）、亞胺培南（100.0%）；對嗜麥芽窄食單胞菌屬有較強體外抗菌活性的為：左旋氧氟沙星（75.0%）、米諾環(huán)素（71.4%）。見表1.

　　

　　

　　

　　3討論

　　

　　最近幾年越來越多的醫(yī)院感染患者的致病菌為非發(fā)酵革蘭陰性菌[1],該菌群的耐藥范圍較廣且其感染率和分離率呈明顯的上升趨勢。我院對非發(fā)酵革蘭陰性菌的耐藥性作了監(jiān)測，結(jié)果表明，多種普遍使用的抗生素對該種細(xì)菌都會產(chǎn)生耐藥，且多重耐藥現(xiàn)象較多，耐藥率呈上升趨勢。在臨床上，美洛培南和碳青霉烯類抗生素亞胺培南都被普遍應(yīng)用在重癥感染的治療中，這得益于其對多種類型細(xì)菌引起的感染均有效。雖然碳青霉烯可用來治療鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌引起的感染，成為重癥患者抗感染治療的第一選擇，但近年來其耐藥性逐漸增加，已經(jīng)不再是該類細(xì)菌病治療的首選藥物，取而代之的是頭孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢四代頭孢吡肟等一線藥物。但氨曲南和喹諾酮類和氨基糖苷類抗菌活性較差。且粘液型銅綠假單胞菌耐受抗生素的穿透，且比較容易定植在患者機體，導(dǎo)致治療失敗，因此，實驗室分離到粘液型銅綠假單胞菌，應(yīng)提示臨床聯(lián)合大環(huán)內(nèi)酯類抗生素（克拉霉素或阿奇霉素）和敏感抗生素聯(lián)合應(yīng)用，抑制粘液型銅綠假單胞菌藻酸鹽粘液質(zhì)的合成，減輕細(xì)菌對組織細(xì)胞的破壞，增強吞噬和殺菌能力，減少炎性因子，從而呈現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)[2].

　　

　　近年發(fā)現(xiàn)的非發(fā)酵菌中，無色桿菌屬和金色桿菌屬最為常見，主要分布在水和土壤中，也可生存于呼吸機管道、靜脈導(dǎo)管、濕化器等多種環(huán)境中，其極易感染免疫力低下患者，最終引發(fā)多種感染性疾病，如心內(nèi)膜炎、腦膜炎、肺炎、菌血癥等。木糖氧化無色桿菌比糞產(chǎn)堿桿菌更易引起呼吸系統(tǒng)感染疾病。此外，該菌還可引發(fā)中耳炎、腹膜炎、心內(nèi)膜炎、化膿性胰腺炎、眼部感染、泌尿系統(tǒng)感染、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、傷口感染、敗血癥、菌血癥等多種疾病。另外，有30%耀50%的產(chǎn)堿桿菌感染者為產(chǎn)堿桿菌同其它需氧菌一起形成的多種微生物混合感染，例如脆弱類桿菌等厭氧菌及鏈球菌、假單胞菌、不動桿菌等需氧病原菌都常同產(chǎn)堿桿菌一起引起患者感染。

　　

　　產(chǎn)堿桿菌屬、金色桿菌屬及伯克霍爾德菌屬同鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌等非發(fā)酵菌一樣，其耐藥機制都較為復(fù)雜，許多抗菌藥物都會引起其耐藥，其中較為嚴(yán)重的耐藥菌包括木糖氧化產(chǎn)堿菌、腦膜膿毒性金黃桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌。洋蔥伯克霍爾德菌主要會導(dǎo)致細(xì)胞缺失膜孔蛋白而降低膜通透性，少數(shù)菌株會誘導(dǎo)產(chǎn)生I類頭孢菌素酶，進而造成第三代頭孢菌素藥物對該類細(xì)菌的作用下降。黃桿菌對多種抗生素耐藥，是由于細(xì)菌的外膜通透性差，可以水解碳青霉烯和其它廣譜內(nèi)酰胺類抗生素。導(dǎo)致對碳青霉烯藥物完全耐藥。木糖氧化無色桿菌對氨基糖甙類、氨芐西林等耐藥，對復(fù)方新諾明及第三代頭孢菌素等敏感，本組資料與文獻(xiàn)報道一致。該菌所致感染在臨床表現(xiàn)上無特異性，由于該細(xì)菌主要侵犯免疫力低下患者，這類患者出現(xiàn)感染時，要及時進行細(xì)菌培養(yǎng)。同時應(yīng)重視原發(fā)病和基礎(chǔ)病的治療。

　　

　　參考文獻(xiàn)：

　　

　　[1]張斌豪，陳志龍。非發(fā)酵菌院內(nèi)感染及其藥敏211例分析[J].醫(yī)學(xué)理論與實踐，2010,23（7）：860-861.

　　[2]梁小英。銅綠假單胞菌常見的耐藥機制[J].中國醫(yī)藥指南，2012,6（10）：65-66.