摘要：Netrins作為神經(jīng)導向因子與膜結合蛋白， 在神經(jīng)細胞遷移、分化及凋亡等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。自發(fā)現以來(lái)， Netrins被認為負責指導中樞神經(jīng)系統組織形態(tài)的發(fā)育， 隨后發(fā)現它也廣泛參與一些非神經(jīng)組織的黏附、遷移和分化等生理過(guò)程， 如血管生成、淋巴管形成和炎癥等。最近的研究表明， Netrins也參與調控腫瘤的發(fā)生與發(fā)展， 在結直腸癌、胰腺導管腺癌等多種腫瘤組織中發(fā)揮重要的調控作用。由于Netrins的功能多樣性且通過(guò)結合不同受體在腫瘤組織中發(fā)揮不同的生物學(xué)效應， 其在腫瘤中的具體作用機制還尚不清楚。本文結合課題組目前的實(shí)驗研究進(jìn)展， 闡述了近年來(lái)關(guān)于Netrins的研究， 特別是在腫瘤領(lǐng)域取得的最新研究結果， 總結了其作用機制， 并對其研究及應用前景進(jìn)行了展望。

　　

　　關(guān)鍵詞：Netrin-1; Netrin-4; 腫瘤； 血管生成； 凋亡； 靶向治療；

　　

　　隨著(zhù)近幾年分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)及表觀(guān)遺傳學(xué)等研究技術(shù)的不斷發(fā)展， 各種生命活動(dòng)和病理進(jìn)程的分子機制逐漸被揭開(kāi)。Netrins作為一類(lèi)自分泌蛋白或者膜結合蛋白， 可以通過(guò)結合不同類(lèi)型受體發(fā)揮不同的作用。它們最初被鑒定為參與中樞神經(jīng)系統的軸索指導， 負責神經(jīng)細胞的遷移、分化和凋亡， 可降低促炎介質(zhì)的血清水平， 并穩定血腦屏障， 限制免疫細胞進(jìn)入中樞神經(jīng)系統[1].除此之外， Netrins[2]也參與介導非神經(jīng)組織的黏附、遷移和分化等生理過(guò)程。目前的研究表明Netrins信號通路與重度抑郁癥[3]、阿爾茲海默癥[4]、心臟肥大和心力衰竭[5]、肥胖癥[6]等疾病均有密切聯(lián)系。特別地， Netrins家族成員促進(jìn)了多種腫瘤的進(jìn)展， 所以， 進(jìn)一步探索Netrins及其受體在腫瘤中的作用機制及其防治意義成為在預防、治療腫瘤相關(guān)機制研究方面的熱點(diǎn)， 并受到廣大科研學(xué)者的青睞。因此， 本文就Netrins在腫瘤中的最新研究成果， 對Netrins在腫瘤中的研究進(jìn)展進(jìn)行總結， 希望對其在腫瘤臨床、靶向治療的研發(fā)提供一定幫助。

　　

　　1 Netrins及其受體簡(jiǎn)介

　　

　　神經(jīng)導向因子Netrins家族是一類(lèi)與神經(jīng)軸突指導相關(guān)的蛋白， 其結構類(lèi)似于層粘連蛋白。1990年， Netrins家族UNC6第一次在秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)Caenorhabditis elegans中被發(fā)現， 證明其與神經(jīng)軸突導向及細胞遷移相關(guān)[7].目前已識別出5個(gè)自分泌蛋白Netrin-1-5[8]和兩個(gè)膜結合蛋白Netrin G1、G2[9].1994年， 在脊椎動(dòng)物中， UNC6的同源物Netrin-1被發(fā)現[10].人類(lèi)的Netrin-1基因定位于17p13.1, 編碼604個(gè)氨基酸大約67.7 k Da;Netrin-2目前發(fā)現在鳥(niǎo)類(lèi)和斑馬魚(yú)中表達， 而Netrin-3則是Netrin-2在哺乳動(dòng)物的同源基因， 定位于16p13.3, 編碼580個(gè)氨基酸大約61 k Da;人類(lèi)Netrin-4[11]是中樞神經(jīng)系統中參與突起生長(cháng)和遷移的自分泌蛋白， 基因定位于12q22-q23, 編碼629個(gè)氨基酸蛋白大約70–84 k Da.如圖1所示， 它們大多是具有N-末端層粘連蛋白結構域 （包含3個(gè)EGF重復序列） 、中樞層粘連蛋白結構域和C末端結構域 （NTR） 的層粘連相關(guān)蛋白[12].而新發(fā)現的家庭成員Netrin-5[13]則缺乏N末端結構域和上皮生長(cháng)因子 （Epidermal growth factor, EGF） 重復序列。另外Netrin-GS[14]在其C末端具有糖基磷脂酰基醇錨 （Glycosylphosphatidylinositol, GPI） , 并且通過(guò)結合糖基磷脂酰基醇實(shí)現細胞膜的結合， 從而發(fā)揮其功能。

　　

　　Netrins的功能與兩類(lèi)受體相關(guān)， 一類(lèi)是結直腸癌缺失蛋白 （Deleted in colon cancer, DCC） [16]家族及其同系物再生蛋白 （Neogenin） [17];另一類(lèi)是UNC5S （Uncoordinated phenotype-5S） [18]家族和最新發(fā)現的受體唐氏綜合癥細胞黏附分子 （Down syndrome cell adhesion molecule, DSCAM） [19]、腺苷A2b （Adenosine receptor A2b, A2b） [20]受體和整合素 （Integrin） [21].DCC和Neogenin介導Netrin-1誘導軸突化學(xué)吸引和排斥[22], 在DCC受體缺乏的情況下， UNC5家族的四個(gè)成員被證明介導Netrin-1誘導的軸突化學(xué)排斥[12,23].

　　

　　2 Netrins與腫瘤

　　

　　近年來(lái)， 越來(lái)越多的研究表明， Netrins在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也起著(zhù)至關(guān)重要的作用， 其作用形式也是一個(gè)復雜的生物學(xué)過(guò)程， 這一過(guò)程中受到眾多腫瘤明星分子及多種信號通路的調節。Netrins家族成員在腫瘤中的作用也不盡相同， 絕大多數證據表明其具有促癌作用。比如， Netrin-1在結腸直腸癌、神經(jīng)母細胞瘤、膠質(zhì)母細胞瘤和轉移性乳腺癌等腫瘤中均表達上調， 并且發(fā)現Netrin-1是癌細胞生存侵襲的促進(jìn)因子[15].這一角色是Netrins通過(guò)結合一系列受體介導的， 包括UNC5S和DCC家族。比如， Netrin-1可以通過(guò)結合受體DCC家族和UNC5家族直接與腫瘤細胞凋亡和血管再生相關(guān)， 而且在某些腫瘤組織中促進(jìn)了癌基因的表達[24].

　　

　　DCC和UNC5S屬于依賴(lài)性受體， 都具有所謂的死亡結構域[25].當受體不與Netrins結合時(shí)， 死亡結構域暴露和Caspase-9結合， 導致Caspase-3被激活促進(jìn)細胞凋亡[26].這類(lèi)受體通過(guò)細胞內信號誘導腫瘤細胞凋亡， 包括結腸直腸癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、胃癌、肺癌或腎癌等多種癌癥， 這種特征賦予這些受體腫瘤抑制活性， 所以這一類(lèi)受體也被視為抑癌因子， 在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演了重要的角色。而當Netrins存在時(shí)， 受體指導細胞存活、遷移和增殖， 這可能與Netrins引發(fā)受體DCC和UNC5S的多聚化相關(guān)[27].并且， UNC5B的表達由p53直接調節， 在沒(méi)有Netrins的情況下， UNC5B介導p53依賴(lài)性途徑誘導細胞凋亡。相反， 在Netrin-1的存在下， Netrin-1和DCC/UNC5S之間相互作用激活的信號通路抑制p53誘導的細胞凋亡， 同時(shí)防止Caspase-3級聯(lián)激活， 導致抗凋亡能力增強[28].另一方面， 有研究顯示Netrin-4在結直腸癌[29]、肝癌[30]也扮演著(zhù)抑癌因子的角色， 但目前， 還不是很清楚Netrins及其受體在不同腫瘤中引起差異的原因。所以， Netrins及其受體在腫瘤的發(fā)展過(guò)程中扮演的精確角色還有待進(jìn)一步研究。

　　

　　因此， 探究Netrins及其受體在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機制及其調控意義對人類(lèi)腫瘤的治療具有重要意義， 關(guān)注Netrins在癌癥、腫瘤細胞發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的生物學(xué)作用已成為焦點(diǎn)。由于腫瘤是一類(lèi)疾病的總稱(chēng)， 不同的腫瘤的遺傳背景差異很大。因此， 下面將從Netrins在不同腫瘤中的研究現狀進(jìn)行總結。

　　

　　2.1 Netrins與結直腸癌

　　

　　結直腸癌 （Colorectal cancer, CRC） 是嚴重影響人類(lèi)健康的消化系統惡性腫瘤之一， 具有較高的發(fā)病率、死亡率[31].

　　

　　在對結直腸癌生物學(xué)研究過(guò)程中， 發(fā)現Netrin-1的受體DCC、UNC5C在結直腸癌及其他腫瘤組織中高頻缺失， 暗示Netrin-1受體缺失途徑在癌癥中的重要性。而Netrin-1通過(guò)抑制細胞凋亡， 在結直腸癌發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)促癌作用[32], 其通過(guò)其跨膜受體DCC和UNC5S參與Hippo信號通路的調節[33], 使細胞核中的YAP水平升高， 增強YAP的信號積累， 從而促進(jìn)癌細胞增殖和遷移。此外， 在腫瘤發(fā)生期間， Netrin-1受體分子改變的時(shí)間并不是隨機的， UNC5C的失活發(fā)生在腫瘤早期， 而DCC缺失發(fā)生在多級結腸直腸癌的后期階段[34].但與野生型UNC5C相比， 突變體UNC5C-A628K卻能減少細胞凋亡， 促進(jìn)腫瘤惡化[35], 因此， 探究Netrin-1和受體之間的作用在治療結直腸癌具有潛在意義。

　　

　　除了Netrin-1外， Netrin-4與結直腸癌的關(guān)系也被逐步確定。Xu等研究發(fā)現， 在結直腸癌肝轉移中發(fā)現血管內皮生長(cháng)因子 （Vascular endothelial cell growth factor, VEGF） 和選擇素 （E-selectin） 上調， 而Netrin-4和LK-68則被抑制[36], 表明Netrin-4與腫瘤血管生成有著(zhù)密切聯(lián)系。Evono等進(jìn)一步研究發(fā)現， Netrin-4可以通過(guò)與其受體Neogenin結合而表現出抗血管生成活性， 但Netrin-4不影響體外VEGF誘導的血管通透性急性增加[37].此外， 通過(guò)比對原發(fā)性結直腸癌和肝、肺部轉移的腫瘤， 發(fā)現過(guò)表達Netrin-4既能抑制異種移植的原發(fā)腫瘤生長(cháng)， 也能顯著(zhù)降低結直腸癌肝轉移模型腫瘤數量和肝轉移體積[29], 表明Netrin-4能降低結直腸癌肺轉移。這些結果表明Netrin-4具有抑制結直腸癌生長(cháng)和主要轉移部位的潛力。

　　

　　2.2 Netrins與胰腺導管腺癌

　　

　　胰腺導管腺癌 （Pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC） 具有發(fā)病隱匿、進(jìn)展迅速、預后極差等特點(diǎn)， 素有癌中之王之稱(chēng)[38].近年來(lái)， 研究人員發(fā)現Netrin-1也在胰腺導管腺癌的進(jìn)展中發(fā)揮著(zhù)重要的作用。

　　

　　Ramesh[39-40]等發(fā)現Netrin-1在胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌等腫瘤組織中高表達， 而且， 在胰腺癌患者中， 沒(méi)有表達或者很少表達Netrin-1的中位生存期為10個(gè)月， 而中等強度或者高表達Netrin-1的患者中位生存期僅僅為4個(gè)月[41].除此之外， Netrin-1及其受體UNC5H3表達對患有分化不良的腫瘤患者的總生存率有顯著(zhù)影響[41].進(jìn)一步研究， 發(fā)現Netrin-1在體外賦予腫瘤和內皮細胞凋亡抗性[42], 為腫瘤細胞提供粘附底物， 誘導其侵襲， 其可能機制是Netrin-1通過(guò)MDM2 （Murine double minute 2） 下調p53的表達， 促進(jìn)腫瘤細胞體外增殖[43].但也有報道顯示， Netrin-1在體內可以抑制胰腺導管腺癌細胞的生長(cháng)， 其與受體UNC5B相互作用激活黏著(zhù)斑激酶 （Focal adhesion kinase, FAK） , 刺激一氧化氮 （Nitric oxide, NO） 的產(chǎn)生， 增強蛋白磷酸酶 （Protein phosphatase2A, PP2A） 的表達， 抑制Mek/Erk/c-Jun信號通路進(jìn)而下調ITGB4的表達， 從而抑制胰腺導管腺癌的生長(cháng)[44].這可能是不同遺傳背景下的胰腺癌中Netrin-1介導的不同受體有關(guān)， 其具體的效用和機制還需要進(jìn)一步評價(jià)。

　　

　　2.3 Netrins和胃癌

　　

　　胃癌是一種嚴重威脅人類(lèi)健康的惡性腫瘤之一， 其發(fā)病率位居第四， 死亡率位居第二[45].

　　

　　研究發(fā)現Netrins在人類(lèi)胃癌細胞組織及病人血清中表達上調， 暗示Netrins可能與胃癌相關(guān)[46].進(jìn)一步的研究發(fā)現， Netrin-1[47]和Netrin-4[48]通過(guò)其受體Neogenin引起致瘤途徑 （Jak/Stat, PI3K/Akt和Erk/MAPK） 的激活， 從而促進(jìn)胃癌細胞的增殖和侵襲能力；當敲低Netrins及其受體能顯著(zhù)抑制胃癌細胞增殖和侵襲， 同時(shí)引起Stat3、Erk、Akt和p38的磷酸化水平降低。除此之外， 同結直腸癌類(lèi)似， Netrins受體缺陷也是胃癌的常見(jiàn)特征， 并且在不同時(shí)期， 受體表達量具有明顯差異。在胃癌發(fā)生的早期進(jìn)程中， DCC和UNC5C基因異常甲基化[49-50], 但在晚期胃癌中這種現象又逐漸消失， 并且Netrin-1濃度升高[51], 表明Netrin-1受體的累積變化是胃癌進(jìn)展的晚期事件。在晚期的胃癌中， 這種動(dòng)態(tài)的變化也許有另外的因子參與了重要調節， 導致受體的失活， 具體的機制還需要進(jìn)一步地研究。

　　

　　2.4 Netrins與乳腺癌

　　

　　乳腺癌是世界各地婦女癌癥死亡的主要原因， 在我國， 乳腺癌是女性中發(fā)病率第一， 致死率第六的惡性腫瘤， 并且近年來(lái)發(fā)病率逐漸上升[52].而腫瘤轉移是乳腺癌患者死亡的主要原因， 通常在多個(gè)部位發(fā)生[53], 常見(jiàn)于肺[54], 肝[55], 腦[56]和骨[57]等。

　　

　　在研究乳腺癌的轉移的機制過(guò)程中， 發(fā)現與人類(lèi)非轉移性乳腺癌不同的是， 大部分轉移性乳腺癌高表達Netrin-1[58].在Netrin-1高表達的乳腺轉移性腫瘤細胞中， 降低Netrin-1表達或者加入其可溶性受體會(huì )發(fā)生凋亡[32].因此大部分人轉移性乳腺癌中， 高表達的Netrin-1具有腫瘤細胞存活的選擇性?xún)?yōu)勢。在針對乳腺癌的治療研究中， 對于Netrin-1靶點(diǎn)治療研究表明， Netrin-1的沉默、干擾Netrin-1/DRs （Dependence receptors） 的相互作用、地西他濱和抗Netrin-1中和抗體的組合可以有效地減少不同的腫瘤生長(cháng)和轉移[25,32,59-62].而在非轉移性的乳腺癌中， 顯示Netrin-1和DAPK1依賴(lài)DNA甲基化表達的缺失[59], DAPK1是一種絲氨酸蘇氨酸激酶， 能夠轉導Netrin-1依賴(lài)性受體促細胞凋亡， DAPK1的缺失導致了腫瘤細胞的進(jìn)一步惡化。

　　

　　另一個(gè)Netrins家族成員Netrin-4與侵襲性的乳腺癌預后相關(guān)[63], Oncomine數據也顯示， 與正常乳腺組織相比， 乳腺癌中Netrin-4降低。Netrin-4過(guò)表達能誘導黏著(zhù)蛋白 （N-cadherin） 和波形蛋白 （Vimentin） 下調， 從而減弱細胞遷移和侵襲[64].但也有報道顯示， Netrin-4在乳腺癌或乳腺癌滲出液中表達很高[65], 并且Netrin-4和α6β1共同整合在特定的血管床上， 促進(jìn)了腫瘤血管的生成作用[20].此外， Netrin-4也可以激活小GTP酶和Src家族激酶/FAK來(lái)刺激體外和體內淋巴通透性， 誘導轉基因小鼠皮膚和乳腺腫瘤中淋巴管和血管的生長(cháng)、遷移， 導致轉移增強[66].這些研究表明， Netrin-4與乳腺癌的轉移密切相關(guān)；然而， 究竟Netrin-4是促進(jìn)乳腺癌轉移還是抑制其轉移， 還需要進(jìn)一步評價(jià)。

　　

　　2.5 Netrins與卵巢癌

　　

　　卵巢癌是死亡率最高的婦科惡性腫瘤之一， 5年生存率不到45%[67].據報道， 在卵巢癌中， Netrin-1隨卵巢癌的惡化而表達升高[68], 并且與SOX6 （Sex-determining region Y box 6） 表達也有相關(guān)性[69].已經(jīng)證實(shí)， SOX6[70]是腫瘤抑制因子， 在細胞增殖、分化中起重要作用， 包括卵巢癌、食管鱗狀細胞癌， 肝癌和慢性骨髓性白血病。而SOX6與Netrin-1在卵巢腫瘤中表達成反比關(guān)系[69], SOX6對卵巢癌細胞體內增殖、細胞侵襲和異種移植生長(cháng)具有抑制作用， 而Netrin-1的過(guò)表達會(huì )顯著(zhù)地消除這一現象。總之， 這些研究表明Netrin-1在調節腫瘤生長(cháng)中具有重要的作用， 對于開(kāi)發(fā)針對卵巢癌的治療藥物具有潛在意義。

　　

　　2.6 Netrins與膠質(zhì)母細胞瘤

　　

　　膠質(zhì)母細胞瘤 （Glioblastoma, GBM） 是顱內最常見(jiàn)的原發(fā)性惡性腫瘤， 中位生存期只有一年多， 也沒(méi)有標準的二線(xiàn)治療[71].

　　

　　目前， 在臨床GBM病理標本中發(fā)現Netrin-1高表達， 并且Netrin-1的表達與干細胞標記物巢蛋白 （Nestin） 相關(guān)， 導致干細胞球體的形成增加[72].研究表明， Netrin-1[73]通過(guò)激活Notch信號， 與干細胞結合， 改變非侵襲性GBM細胞表型， 促使擴散入侵并增加GBM干細胞標記物巢蛋白的表達。并且， Netrin-1與細胞增殖、腫瘤惡性分級呈正相關(guān)[74], 可在體外和體內介導UNC5A誘導NF-κB p65 磷酸化和c-Myc表達， 促進(jìn)GBM細胞增殖[75].并且研究發(fā)現靶向抑制Netrin-1的表達， 特別是干細胞樣細胞浸潤生長(cháng)受到顯著(zhù)抑制[72], 腫瘤細胞增殖、存活率和侵襲能力也顯著(zhù)減弱[76].Netrin-1作為GBM干細胞干性和運動(dòng)的重要調節因子， 為探索治療膠質(zhì)母細胞瘤的藥物靶點(diǎn)提供有力支持。

　　

　　而另一個(gè)成員Netrin-4可能作為致癌基因， 與ITGB4共同作用激活Akt-m To R信號通路促進(jìn)成膠質(zhì)母細胞瘤增殖；而且發(fā)現抑制Netrin-4或者ITGB4都會(huì )增強膠質(zhì)母細胞瘤對藥物替莫唑胺 （Temozolomide, TMZ） 的敏感性， 外源性添入Netrin-4和ITGB4會(huì )減弱TMZ誘導的細胞凋亡[77].但也有研究顯示， Netrin-4也能在膠質(zhì)母細胞瘤內激活Erk-MAPK信號通路， 從而抑制GBM細胞的增殖[78].總之， 研究顯示， Netrin-4在膠質(zhì)母細胞瘤的研究中有重要的作用， 但為何形成這種差異還需要進(jìn)一步探究。

　　

　　2.7 Netrins與神經(jīng)母細胞瘤

　　

　　神經(jīng)母細胞瘤 （Neuroblastoma, NB） 是兒童早期最常見(jiàn)的實(shí)體瘤之一， 在新生兒中的發(fā)病率為1/10 000–1/8 000[79].Netrin-1通過(guò)阻斷UNC5S的促凋亡活性， 在侵襲性NB的生長(cháng)和傳播中傳遞了選擇性?xún)?yōu)勢[80].神經(jīng)母細胞瘤之所以侵襲性強， 是因為小GTP酶Rac1活性是神經(jīng)軸突生長(cháng)所必需的， UNC5A和DCC通過(guò)激活Rac1引發(fā)細胞皮層肌動(dòng)蛋白重組， 而肌動(dòng)蛋白的裝配會(huì )引起腫瘤細胞的侵襲轉移， 恰巧Netrin-1能加強刺激UNC5A和DCC導致Rac1激活[81-82].而另外一個(gè)受體UNC5D是p53家族成員直接靶向的依賴(lài)性受體[83].在NB中， 神經(jīng)生長(cháng)因子 （Nerve growth factor, NGF） 大大加強了UNC5D、E2F1和p53的調控， 誘導的UNC5D被天冬氨酸蛋白水解酶2/3 （Caspase2/3） 裂解， 釋放的細胞內片段轉移到細胞核中并與E2F1相互作用， 選擇性地反式激活前凋亡靶基因， UNC5D與p53和E2F1形成正反饋回路， 以促進(jìn)神經(jīng)母細胞瘤回歸過(guò)程中NGF依賴(lài)介導的程序性細胞死亡[84], 但Netrin-1的表達強烈抑制UNC5D的裂解及其誘導的凋亡[85], 以此來(lái)抑制神經(jīng)母細胞瘤的程序性死亡。

　　

　　Netrins的另外一個(gè)受體Neogenin-1也是一種在胚胎發(fā)育和成體內穩態(tài)期間， 參與軸突引導、血管生成、神經(jīng)元細胞遷移和細胞死亡的跨膜受體[86-89].Villanueva[90]等發(fā)現在NB中， 在其配體不存在的情況下， Neogenin-1也能促進(jìn)細胞死亡， 但敲低Neogenin-1會(huì )減少細胞遷移。Neogenin-1及其配體Netrin-1和Netrin-4在原代神經(jīng)母細胞瘤中的表達較高， 預示著(zhù)患者存活率差[90].在神經(jīng)母細胞瘤中， DCC、UNC5S和Neogenin-1的表達預示著(zhù)腫瘤的遷移侵襲能力增強， 而他們卻都能促進(jìn)細胞的凋亡， 一方面發(fā)揮著(zhù)腫瘤抑制的角色， 一方面又促進(jìn)了腫瘤的發(fā)展。這些數據表明Netrins及其受體可能作為治療神經(jīng)母細胞瘤特定的靶標因子， 具有極其重要的作用。

　　

　　2.8 Netrins與其他腫瘤

　　

　　除了上述腫瘤外， Netrins及其受體在其他腫瘤中目前研究還較少， 但是也發(fā)揮著(zhù)重要的作用。例如， 阻斷中樞系統成神經(jīng)管細胞瘤中表達的內源性Netrin-1, Neogenin或UNC5B能夠抑制其侵襲[91].在多發(fā)性骨髓瘤[92]、前列腺癌細胞[93]中Netrin-1水平顯著(zhù)升高， 而其受體UNC5B表達受到抑制[93].在黑色素瘤中， Netrin-1通過(guò)結合受體UNC5B促進(jìn)黑色素瘤細胞侵襲和遷移， 在惡性黑色素瘤的進(jìn)展中起重要作用[94], 隨著(zhù)近年來(lái)抗體療法的出現， 2C9作為UNC5B的單克隆特異性抗體， 經(jīng)過(guò)2C9處理后的黑色素瘤細胞的遷移侵襲作用明顯受到顯著(zhù)抑制[95-96].在晚期非小細胞肺癌組織中發(fā)現Netrin-1濃度隨化療而降低[40], 以及在彌漫性大B細胞淋巴瘤和套細胞淋巴瘤中[97], 也發(fā)現Netrin-1高表達， Netrin-1的功能干擾與DCC、UNC5H介導的細胞死亡有關(guān)， 得益于受體作為抑癌因子的作用。在宮頸癌或晚期子宮內膜異位癥 （III-IV期） 中， mi R-196和mi R-20a高表達， 并通過(guò)靶向結合Netrin-4 m RNA 3'-UTR中的一個(gè)結合位點(diǎn)來(lái)抑制Netrin-4的表達， 在這里， Netrin-4扮演著(zhù)腫瘤抑制因子的角色[98-99].在成纖維肉瘤HT1080細胞中， 敲低Netrin-4能抑制該腫瘤細胞的增殖， 但促進(jìn)了遷移、侵襲能力[100].這些研究表明， Netrins家族成員， 尤其是Netrin-1和Netrin-4與許多腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。然而， 它們在腫瘤中的研究還比較局限， 很多作用機制還不夠清楚， 需要更多數據來(lái)支持。

　　

　　3 總結與展望

　　

　　本文總結了近年來(lái)Netrins及其受體在結直腸癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、膠質(zhì)母細胞瘤、神經(jīng)母細胞瘤及其他腫瘤中的最新研究進(jìn)展， 顯示了Netrin-1、Netrin-4在這些腫瘤中的重要意義。Kefeli等也總結了大量研究資料得出Netrin-1具有促癌作用， 被認為是一個(gè)非常重要的治療靶標[24].

　　

　　大多數Netrins受體如DCC和UNC5S家族往往扮演著(zhù)抑癌的角色。它們激活p53等凋亡途徑的凋亡活性， 從而降低腫瘤細胞的存活能力。通過(guò)缺失受體， 過(guò)表達配體或抑制下游信號傳導能夠抑制Netrins受體的抑癌作用。例如， 依賴(lài)性受體DNA的異常甲基化、突變都會(huì )使受體的凋亡活性喪失。

　　

　　而Netrins, 尤其是Netin-1和Netrin-4, 可以通過(guò)結合這些受體， 競爭性地抑制其活性， 封閉其抑癌作用， 而促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生發(fā)展， 如表1和圖2所示。Netrins作為促癌基因對于腫瘤細胞的存活是有利的， Netrins的表達激活了血管內皮生長(cháng)因子的表達， 以及Mek/Erk、Akt/Stat3、Notch、m To R和NF-κB等信號途徑， 并可以促進(jìn)原癌基因c-Myc的表達， 從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。因此， 進(jìn)一步研究Netrins在腫瘤中的作用及其機制， 有利于針對Netrins及其受體， 開(kāi)發(fā)出新型的靶向治療抗體或者其特異性抑制。

　　

　　另外， Netrins作用機制研究的不斷深入不僅有利于開(kāi)發(fā)新型的抗腫瘤療法， 也會(huì )對進(jìn)一步理解Netrins在神經(jīng)系統及免疫過(guò)程中的作用機制提供參考。比如Netrins調控的m To R信號通路也廣泛參與了神經(jīng)細胞的調節和免疫細胞的活性[101-102].

　　

　　但是， 目前對Netrin家族其余成員Netrin-2、Netrin-3、Netrin-5及Netrin-GS在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的研究尚少。因此， 對Netrin家族其余成員在腫瘤細胞中是否起著(zhù)關(guān)鍵作用也是值得探究的。這些研究對于實(shí)現腫瘤的靶向治療具有重要的意義， 希望能對臨床用藥及其機制研究提供幫助。

　　

　　表1 Netrins在不同腫瘤中的表達情況、功能及其介導的下游信號通路。“↑”代表在腫瘤中上調；“↓”代表在腫瘤中下調Table 1 Summary of the netrins expression, suggested functions and novel pathways in different cancers.“↑”stand for increased in this tumor;“↓”stand for reduced in this tumor
 

　　

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